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流式细胞仪调节荧光补偿
流式细胞仪
-
调节荧光补偿
是不是把其他颜色荧光都调到零是最好的?_百度...
答:
荧光补偿是因为每个荧光的光谱都比较宽
。用你的例子来说,就是PI的荧光,不仅被PI这个通道的探测器所感应到,而且也同时被FITC的探测器感应到,所以一个PI染色会出现在双染的区域。另外FITC的荧光,也会同时被两个探测器所检测到。这时候就要做compensation.你做compensation的时候,必须有3个管子,一个...
荧光补偿
名词解释?
答:
二、流式细胞术
荧光补偿
: 所有的荧光染料都同时具有激发和发射光谱。激发光谱是增加荧光染料能量的光波长范围,可使荧光染料发射另一波长范围的光,即发射光谱。在
流式细胞仪
中,带通滤光片用于选择适宜范围的激发和发射波长。但是,当发射光谱重叠时,会检测到来自一种以上荧光染料发射的荧光。因此,...
如何选择适合的
流式
抗体(五):举例
答:
流式细胞仪的荧光补偿需要定期调整以适应实验条件
。不当的补偿可能导致细胞分群不明显或结果图不准确。补偿微球(BD CompBeads)是一种用于多色分析和复合荧光素补偿调节的微球,它不携带任何荧光,通过与客户自己的特异性荧光抗体结合来调节补偿。使用补偿微球可以简化补偿调节过程,提高灵敏度和一致性,适用...
如何选择适合的
流式
抗体(五):举例
答:
流式细胞仪的荧光补偿隔一段时间之后需要调整到适合的位置
。如果荧光补偿没有调节好,会导致细胞分群不明显或者流式检测得到的结果图非常不漂亮,而且会影响到检测结果的不真实。荧光补偿的调节对初学者来说非常不容易掌握,同时,补偿调节是流式细胞术中比较难掌握的操作。尤其是一些不常见的标志检测时,需要经验非常丰富...
关于
流式细胞仪荧光
信号测量的描述,不正确的是
答:
【答案】:D 每两种荧光的发射光信号中会有不可避免的重叠现象,重叠区域越大,信号检测的准确性越差。
此干扰信号必须依靠荧光补偿调节消除
。
用
流式细胞仪
检测各个象限的意义
答:
单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出;鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液,一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用,被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体,受到振荡信号可发生振动。以上内容参考:百度百科-
流式细胞仪
...
流式
课堂 | 流式配色基本原则
答:
受制于
流式细胞仪
的配置,出现
荧光
干扰在所难免。如何将这种影响降到最低呢?首先 实验需要设置单阳对照,用于
调节补偿
。在做数据分析时,为了将这种荧光干扰降到最低,可以考虑将有溢漏的荧光素,放在相互排斥的Marker上。其次 如果是共表达的Marker,在表达量高的情况下,是允许溢漏的。最后 配色时...
流式细胞仪
的原理和操作过程
答:
减少自发
荧光
干扰、提高信噪比的主要措施是:①尽量选用较亮的荧光染料;②选用适宜的激光和滤片光学系统;③采用电子
补偿
电路,将自发荧光的本底贡献予以补偿。操作过程:①打开电源,对系统进行预热;②打开气体阈,
调节
压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统;③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的...
流式
图解析
答:
1). 必须有不染色的
细胞
作为空白对照 2). 抗原抗体的结合是否是特异性结合 a. 用同型对照判断是否存在非特异性结合 b. 用Fc block阻断细胞上的Fc受体非特异结合
流式
抗体 c. 用死活染料排除死细胞的干扰 3). 用阳性对照检验染色方案是否可行 4). 不同
荧光
素重叠光谱之间的
补偿
,单染管对照,FMO...
求助,
流式细胞仪
检测多抗原前准备
答:
计算染色指数(stain index),SI最高的那个浓度,就是最佳工作浓度。4. 每个抗体的最佳工作浓度都确立后,染样本的时候,也要使用同样的
细胞
浓度来染。5. 除了要检测的样本外,另外还要准备无染色样本,每个抗体单独染色的阳性样本,作为
调节荧光补偿
之用。完成了这些后,就可以去检测你的样本了。
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