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如何设计引物扩增基因全长
要
扩增全长
cDNA
引物怎样设计
答:
如果基因太长了,那就设计多段引物,一段一段把基因pcr出来再连在一起
。如果你要扩增的是cDNA的话,也就是蛋白质的cDNA序列的话,就去ncbi-gene里面找到相应蛋白质的序列,再设计引物,以cDNA文库位模版把目标基因给pcr出来。
已知
基因
片段
如何扩增
得到其
全长
及
如何设计
特异性
引物
?
答:
最重要的是引物设计,首先要弄清楚你要扩增基因的大小,
如果特别的长,那就需要做拼接PCR,再有就是要设计特异性好的引物以防止非特异的出现
,对于这一点可以去NCBI做PRIMER BLAST。
...某目的
基因
的cDNA序列,要pcr
扩增
此基因cDNA
全长
,
引物怎样设计
?
答:
如果是要表达该基因的话把CDS区扩增出来就可以了 想扩增全场的话只能引物设计在前后端了
不过后面是Poly T, 所以估计反转录的时候得加一个adapter 这样才能扩增完整的出来 还是比较麻烦的 而且全长的话太长了 要用高保真的酶 很容易出现错配和突变 ...
如果知道
基因
PCR
引物
的上下游片段,
如何
获得基因的
全长
?
答:
直接把全部基因放到PCR机里面开启PCR
,即可以得到该基因 继而得到该基因的全长
如何设计引物扩增
某病毒的M
基因
,要扩出
全部
的M基因。
答:
要到数据库中检索你的目的基因序列
,要调完整的基因只能从上下游设计引物。
已知一
基因
的
全长如何
将其全长扩出来?
答:
设计引物
,RT-PCR将其
扩增
出来
已知蛋白质N端序列,要想
扩增
其
全基因
,
怎样设计引物
?
答:
首先请上NCBI BLAST搜索之(blastp)。或许可以直接查到你研究物种的
基因
序列。即使没有,有近缘物种的基因序列也是个好的参考,通过比对,选择序列保守区
设计引物
。若搜索不到任何信息,就需要通过设计兼并引物。比如你的蛋白质N端序列为 MTAGSR...上游引物即为5'-ATG NNN NNN ...-3'(参考那个密码...
已知蛋白质N端序列,要想
扩增
其
全基因
,
怎样设计引物
?从5'端or3‘端...
答:
要保证PCR反应能准确、特异、有效地对模板DNA进行
扩增
,通常
引物设计
要遵守以下几条原则:①引物长度:15~25个核苷酸;②CG含量为40%~60%;③Tm值高于55℃[Tm=4(C+G)+2(A+T)计算];④引物与模板非特异性配对位点的碱基配对率小于70%;⑤两条引物间配对碱基数小于5个;⑥引物自身配对(特别是在...
克隆cdna
全长
在哪
设计引物
答:
在头尾两端
设计引物
。1、cdna序列选取一组引物,要求引物混合中不同引物的Tm值相近。2、cdna序列和所选的引物,计算符合头尾位点要求的引物混合成分。3、计算出来的比例和用量,混合所需的引物,得到最终用于
扩增
cdna
全长
的引物混合。
已知一个cDNA的部分序列,请
设计
实验流程得到该
基因
的
全长
cDNA。
答:
1,根据已知序列设计三条巢式引物,进行5’RACE,拿到5’序列;2,同时设计巢氏引物,进行3’RACE拿到3’序列;3,序列拼接;4,
设计引物扩增全长
序列
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
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灏鹃〉
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