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反转录反应
反转录
PCR操作步骤
答:
PCR操作的
反转录
步骤分为两个主要阶段:总RNA的提取和cDNA第一链的合成,以及随后的PCR
反应
。首先,从样本中提取总RNA。通常取1-5微克RNA,加入DEPC H2O至11微升,再加入Oligo(dT)12-18进行混合。将混合液加热至70℃10分钟后,迅速冷却至冰浴。接下来,按照配方加入SuperScriptTM Preamplification Syst...
什么是
反转录
-套式聚合酶链
反应
(RT-nPCR)?
答:
RT-nPCR实际叫做
反转录
-巢式PCR,反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR
反应
,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内...
反转录
可以用水浴吗
答:
反转录
可以用水浴。根据查询相关公开信息显示,反转录酶一般需要在适当的温度下工作,通常是在37℃左右。因此,
反转录反应
可以在水浴中进行,将反应管或PCR管放入水浴中,使其保持在37℃的温度,以确保反应的顺利进行。
关于
反转录
pcr的描述,不正确的是
答:
关于反转录pcr的描述,不正确的是:反转录酶不需要引物进行
反转录反应
反转录是以RNA为模板合成cDNA的过程。在这个过程中遗传信息的流动方向和转录时相反,所以称为“反转录”。在这个过程中需要一个反转录酶,合成的DNA称为与RNA互补的DNA(complementaryDNA,cDNA)。这个过程中根据不同的情况选择不同的...
RT-PCR原理及操作
答:
原理:RT-PCR 为
反转录
RCR(reverse transcription PCR)和实时PCR(real time PCR)共同的缩写。逆转录PCR,或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式
反应
(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。步骤:(一...
什么是
反转录
答:
反转录
PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR
反应
,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式...
反转录
名词解释
答:
反转录
聚合酶链式
反应
(RT-PCR):RT-PCR是一种结合了反转录和聚合酶链式反应(PCR)的技术。它首先利用反转录将目标RNA转录为cDNA,然后利用PCR扩增cDNA的数量,并进行进一步的分析。RT-PCR常用于研究基因表达、检测病毒和疾病诊断等领域。单细胞转录组分析:单细胞转录组分析是一种利用反转录技术从单个...
反转录反应
可以用0.5ugrna吗
答:
可以。刚学会作
反转录
,用的是Fermentas的反转录试剂盒,20ul的体系,说可以转录0。1~5ug的总RNA。曾试着用不同个体的RNA样本,每次用50ng、100ng、200ng、300ng、400ng、800ng、1ug、2ug、4ug的总RNA做反转录,结果得到的cDNA浓度都在2300~2500ng/ul。只有50ng的时候稍微少一些2200ng/ul,...
我想问什么是
反转录
PCR?
答:
反转录
PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR
反应
,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢...
反转录
必须设置循环次数吗
答:
反转录
是一种将RNA转录成DNA的过程。在反转录过程中,通常需要使用逆转录酶来合成DNA链。关于循环次数的设置,可以根据具体实验的需要来决定。在一般的反转录实验中,通常使用聚合酶链式
反应
(PCR)来扩增合成的DNA片段。PCR需要进行多个循环,每个循环包括三个步骤:变性、退火和延伸。在PCR循环的每个步骤...
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