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免疫组化染色注意事项
免疫组化
实验
染色
的
注意事项
及影响因素有哪些?
答:
影响免疫组化染色质量的因素有很多,
在实验中应注意组织的取材和固定,选择质量好的商品化抗体,恰当地选择和使用封闭和抗原修复手段
,严格的技术操作和对照等。1。假阴性反应可发生在:1) 组织内待测抗原已被分解破坏,或抗原含量过低;2) 抗原被遮盖,多由于醛类固定剂的使用,使组织中的大分子蛋白借...
HE 染色和
免疫组化染色
可以同时做吗?
答:
1)做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色
,因为那样会掩盖阳性着色的结果;而且用苏木素复染细胞核也是淡染,若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变,除非有非常典型的表现,一般是有很大的难度的。2)你是培养的细胞做免疫组化吗?如果是的话,那就每个样本只有一张片子吧?唯一的办法是进行免疫...
免疫组化
DAB
染色
,结果应该是什么颜色
答:
楼主可以注意以下操作:1.标本进行PBS 清洗时,以5 分钟清洗3 次为标准
。2. PBS 清洗后,为了各种反应的有效进行,请尽量除去PBS 溶液后再进行下一步反应 3. 在载玻片上的样本上加上实验用反应液后,请盖上盖玻片或保鲜膜,或在湿盒中进行,这样可以使反应液均匀分布于样本整体,又可以防止反应液干...
...取材的时候有什么
注意事项
?我准备做
免疫组化
固定
答:
以下是注意事项:1. 固定时间:固定的时间一般在1-2小时左右
,不宜过长。固定时间过长会导致组织硬化,影响后续的制片过程。2.
固定剂的浓度和pH值
:应根据组织类型和固定剂的种类选择合适的浓度和pH值。一般来说,甲醛的浓度在1-4%之间,pH值在7.2-7.4之间。
3. 取材:固定后的组织应立即取材
...
抗原修复的作好
免疫组化染色
必须
注意
的问题
答:
应用于免疫组织化学染色的切片,对切片的质量要求较高,切片必须完整,平展、无汽泡,无邹折,这样有利在染色时的冲洗,有利于切片的牢固附贴。如果切片不平展,
免疫组化染色
后,可出现染色不均匀的现象,颜色深浅不一, 不平。如果切片有汽泡切片在烘烤时,由于汽泡的破裂影响了汽泡周围的组织,在其周围可观察到深浅不...
组织
染色
前处理包括哪些内容
答:
2、取材:组织标本的取材厚度般为0.3厘米。3、脱水:组织在脱水机中的处理需十分恰当。4、包埋与切片:组织经过脱水、透明及浸蜡后,进行石蜡包埋。5、切片与展片:切片也是
免疫组化染色
的重要环节,厚度在35微米之间,淋巴结组织和肾穿组织切片应该更薄些。6、烤片:58至60°C恒温箱烤片23小时。
免疫组化
的操作步骤
答:
一
免疫组化
(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景
染色
,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block , 在室温下孵育 ...
关于细胞
免疫
荧光
染色
的问题
答:
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性
染色
。(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片
免疫组化
,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗...
免疫组化
不是抗体的原因那为什么只有背景有色
答:
(5)切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长(大于24小时):原因上不清楚,但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复,第二天加抗体进行
免疫组化染色
,如果将装有切片和修复液的容器放在4?C冰箱过夜,对结果无明显影响,如果放在室温,特别是炎热的夏天,会出现背景着色,因此,不可存放时间太...
免疫组化
一张片子多个样品可以同时染几个不同抗体吗
答:
免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化,在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果,又能看到细胞的形态,CD34+
免疫组化染色
后是棕色的颗粒,效果很好。1)做免疫组化的片子最好不要...
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